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產(chǎn)品介紹: | |||
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產(chǎn)品規(guī)格: | 100ml | 產(chǎn)品品牌: | MP Biomedicals |
參考價(jià)格:: | ¥ | ||
詳細(xì)說(shuō)明: | |||
Lymphocyte Separation Medium
淋巴細(xì)胞分離試劑(LSM) -----美國(guó)Mpbio公司 用途:
用于體外分離外周淋巴細(xì)胞,也可以從其他來(lái)源中分離單核細(xì)胞,包括臍帶血細(xì)胞和骨髓細(xì)胞。
方法概述:
分離混合血液白細(xì)胞早期的方法,總是伴隨紅細(xì)胞聚集,只輕微影響白細(xì)胞。通過(guò)離心,紅細(xì)胞密度增加聚集,同時(shí)可以從離心管上部收集白細(xì)胞。
Boyum提出了一種更方便,通過(guò)使用Ficoll甲泛影鈉溶液離心快速分離方法。稀釋的血液在Ficoll甲泛影鈉溶液中分層,低速短時(shí)離心。紅細(xì)胞和沉降到管底的粒細(xì)胞,和單個(gè)核細(xì)胞(淋巴細(xì)胞)和血小板可以從兩個(gè)分層之間收集。
許多研究者不斷努力,修訂了Boyum方法,MP生物醫(yī)學(xué)公司生產(chǎn)的LSM,方法的獨(dú)特之處是運(yùn)用泛影鈉成功的代替了甲泛影鈉。
程序原理:
除去血液中的纖維蛋白或肝素處理血液以1:1的比例用生理鹽水或平衡鹽溶液稀釋,在分離溶液中分層,低速離心30分鐘。通過(guò)離心,遷移能力不同最終形成不同的細(xì)胞層。
大部分的紅細(xì)胞和粒細(xì)胞通過(guò)梯度遷移形成顆粒狀。由于其密度不同,淋巴細(xì)胞和其他單個(gè)核細(xì)胞(單核細(xì)胞和血小板)分布在血漿和LSM兩層中間。淋巴細(xì)胞可以通過(guò)回抽分層回收,在進(jìn)一步去除血小板,LSM和血漿。
試劑:
LSM是一種滅菌過(guò)濾溶液,每100毫升包含6.2克聚蔗糖和9.4克鈉胺。密度是1.0770-1.0800克/毫升20℃
使用說(shuō)明:
以下的操作步驟是最初由Boyum設(shè)計(jì)的程序的眾多改良版本中的一種。此程序的改良是通過(guò)運(yùn)用除去血液中的纖維蛋白或搞凝血?jiǎng)┨幚砣梭w血液,這種改良對(duì)于其他物種來(lái)源血液或者其他組織非常有必要。
1.輕輕顛倒瓶子使LSM充分混合
2.無(wú)菌轉(zhuǎn)移3mlLSM到15ml離心管中
3.混合2ml除纖維蛋白血液或肝素處理血液和2ml生理鹽水
4.仔細(xì)的將稀釋血液加入3mlLSM(室溫)于15ml離心管中,在血液和LSM中形成一個(gè)明顯的分層。不要將稀釋血液混合入LSM中
5.室溫下400g離心15-30分鐘,離心可以沉淀紅細(xì)胞和多核白細(xì)胞同時(shí)可以再LSM上形成一層單核淋巴細(xì)胞。
6.吸出淋巴細(xì)胞上方2-3mm的血漿
7.吸取淋巴細(xì)胞層以及它下面一半的LSM和轉(zhuǎn)移到另外的一個(gè)離心管。加入等體積的平衡鹽緩沖液至淋巴細(xì)胞離心管中,室溫離心10分鐘,離心速度設(shè)定在既不損傷細(xì)胞又能沉淀細(xì)胞即刻,例如160-260×一(去除LSM和降低血小板的百分比)
8.用平衡鹽緩沖液清洗細(xì)胞,用適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基重懸細(xì)胞。
訂購(gòu)信息:
貨號(hào) 品名 規(guī)格
0850494X LYMPHOCYTE SEPARATION MEDIUM l00ml
0850494 LYMPHOCYTE SEPARATION MEDIUM 5x100 ml
廠家說(shuō)明:
MP Biomedicals生物醫(yī)學(xué)公司是位于美國(guó)加利福尼亞州的知名生命科學(xué)和生物技術(shù)廠商。2004年底成功收購(gòu)Qbiogene、ICN,現(xiàn)在全球有5個(gè)大型倉(cāng)庫(kù),能夠及時(shí)供應(yīng)各行業(yè)需求,亞洲倉(cāng)庫(kù)位于新加坡。它致力于生命科學(xué)領(lǐng)域的基礎(chǔ)研究和探索。目前它提供55000多種產(chǎn)品,是世界上能全面提供生命科學(xué)產(chǎn)品和臨床診斷產(chǎn)品的幾家廠商之一。
北京畢特博生物技術(shù)有限責(zé)任公司 400熱線:400-833-9299 電話:010-82015225 傳真:010-62015131 聯(lián)系人:張鈺 手機(jī):13366202681 QQ:1050524889
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購(gòu)買進(jìn)口儀器、試劑和耗材——就在始于2001年的畢特博生物
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